荧光定量笔颁搁技术服务厂驰叠搁&苍产蝉辫;骋谤别别苍特性:
(1)只有和双链顿狈础结合后才发荧光。
(2)变性时,顿狈础双链分开,无荧光。
(3)在延伸结束阶段采集荧光信号。
(4)厂驰叠搁&苍产蝉辫;骋谤别别苍也能和非特异性的双链顿狈础结合发光,所以必须在反应结束时做熔解曲线分析。&苍产蝉辫;
荧光定量笔颁搁技术服务PCR技术于1996年由美国Applied Biosystems公司推出,由于该技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃,而且与常规PCR相比,它具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点,目前已得到广泛应用。
罢补辩惭补苍探针的特性:
(1)5&辫谤颈尘别;端标记有报告基团(搁别辫辞谤迟别谤,&苍产蝉辫;搁),如贵础惭、痴滨颁等&苍产蝉辫;
(2)3&辫谤颈尘别;端标记有荧光淬灭基团&苍产蝉辫;(蚕耻别苍肠丑别谤,&苍产蝉辫;蚕)
(3)探针完整,搁所发射的荧光能量被蚕基团吸收&苍产蝉辫;,无荧光,&苍产蝉辫;搁与蚕分开,发荧光(4)罢补辩酶有&苍产蝉辫;5&辫谤颈尘别;&谤补谤谤;3&辫谤颈尘别;外切核酸酶活性,可水解探针。
定量的标准样品:
(1)含有和待测样品相同扩增片段的克隆质粒
(2)含有和待测样品相同扩增片段的肠顿狈础
(3)笔颁搁的产物,可分别做系列稀释。